分享！實驗室用人elisa試劑盒的操作方法和注意事項-上?；钌锟萍加邢薰?/title> <META NAME="Keywords" CONTENT="實驗室用人elisa試劑盒操作方法"> <META NAME="Description" CONTENT="實驗室用人elisa試劑盒是以免疫學反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的實驗技術。"> <link rel="stylesheet" type="text/css" href="/Skins/515143/css/style.css"/> <link rel="stylesheet" type="text/css" href="/skins/515143/css/swiper.min.css"> <script src="/skins/515143/js/jquery-3.6.0.min.js"></script> <script src="/skins/515143/js/swiper.min.js"></script>  <script language="javascript" type="text/javascript"> var nav= '4'; </script>  <link rel="shortcut icon" href="/skins/515143/favicon.ico"> <script type="application/ld+json"> { "@context": "https://ziyuan.baidu.com/contexts/cambrian.jsonld", "@id": "http://www.xuzhoushixinda.com/News-1458371.html", "title": "分享！實驗室用人elisa試劑盒的操作方法和注意事項", "pubDate": "2023-02-26T14:39:56", "upDate": "2023-02-26T14:39:56" }</script> <script> (function(){ var bp = document.createElement('script'); var curProtocol = 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target="_blank">實驗室用人elisa試劑盒</a></strong>是以免疫學反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的實驗技術。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應物，從而保證試驗結果的特異性與穩定性。</div><div> </div><div>　　目前，實驗室用人elisa試劑盒應用定性夾心免疫檢測技術，用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條，這些多肽是中國型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強的肽段，分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或標準品加入孔中并孵育，如果其中存在HEV IgM抗體，這些抗體就會與HEV的多肽抗原結合，并固定在上面，洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP（辣根過氧化物酶）酶結合物，經第二次孵育后，酶結合物就會與第一次孵育結合上的HEV IgM抗體相結合，洗板除去未結合的酶結合物，加入TMB底物溶液，在第三次孵育時會發生酶-底物反應，只有那些含有HEV IgM抗體和酶結合物所形成的復合物的孔才會發生顏色變化，加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應，并在波長: 450nm處測量O.D.值，按照本HEV IgM抗體elisa試劑盒的測試標準，O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認為是初試陽性。</div><div> </div><div>　　操作方法：</div><div>　　1、包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1～10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。</div><div>　　2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中，置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。</div><div>　　3、加酶標抗體：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體（經滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時，洗滌。</div><div>　　4、加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。</div><div>　　5、終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。</div><div>　　6、結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺，依據所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對照孔調零后測各孔OD值，若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。</div><div> </div><div>　　實驗室用人elisa試劑盒的注意事項：</div><div>　　1、試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。</div><div>　　2、濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。</div><div>　　3、各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。</div><div>　　4、請每次測定的同時做標準曲線，最好做復孔。如標本中待測物質含量過高，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數（×n×5）。</div><div>　　5、封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。</div><div>　　6、底物請避光保存。</div> </div> </div> <div class="artview_prev_next"> <p class="artview_prev"><span></span>上一篇：<a href="/News-1464484.html">使用大鼠睪酮(T)elisa檢測試劑盒即有效又便捷</a></p> <p class="artview_next"><span></span>下一篇：<a href="/News-1453111.html">人降鈣素(CT)elisa試劑盒是怎么操作的？又該注意哪些事項？</a></p> </div> </div> </div> </div> <div id="clear"></div> <footer>  <div class="foot1"> <div class="foot1_in clear clearfix"> <ul 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