人降鈣素(CT)elisa試劑盒測定現通常為采用手工操作的以微孔板條為固相的測定模式,測定操作非常簡單,一般涉及到標本的收集保存、試劑準備、加樣、溫育、洗板、顯色、比色、結果判斷和結果報告及解釋等方面,其中任一步驟的不當都會影響測定結果,且尤以加樣、溫育和洗板等步驟為甚。
檢測原理:
人降鈣素(CT)elisa試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
人降鈣素(CT)elisa試劑盒樣品收集、處理及保存方法:
1、血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離;
2、血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清;
3、細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物;
4、組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清;
5、保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解。